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第二天早上,在仁和医科大学分子生物学实验室门口,罗帆与白映雪碰面,小姑 娘淡淡的黑眼圈说明这个丫头夜间一定没有睡好,不过,小姑娘还是很开心的样子, 白映雪带着罗帆来到实验台前,按照程序,把相关的实验演示一遍,包括 1、目标基因 的获取;2. 基因表达载体的构建;3、将目标基因导入受体细胞;4、扩增后目标基因 的检测与鉴定。四个步骤。
目标基因是指编码蛋白质的结构基因,在白映雪的研究中,目标基因就是白介素 6(IL-6) 的基因片段,白介素 6 虽然只是一个多肽类物质,但是它也有结构基因,有人 认为,IL-6 基因启动子区 -572G/C, 597G/A 多态性与炎症反应及冠心病的发生,发展 有重要关系,所以,白映雪的研究目标就是瞄准这一段 DNA 的碱基,通过致病菌内毒 素的刺激,观察炎症细胞中 IL-6 中目标碱基( -572G/C, 597G/A) 的增殖情况,获取的 方法有:第一步:采集分离人体巨噬细胞;第二步:利用革兰氏染色阴性菌分泌的内 毒素刺激该巨噬细胞,使其分泌 IL-6,第三步:利用 PCR(聚合酶链反应)技术扩增 IL-6 的目标碱基( -572G/C, 597G/A 碱基);此外,还可以人工合成此目标碱基;或将 天然目标碱基和人工合成的目标碱基分别注射入小鼠体内,观察炎症反应情况,再对 比此两种碱基的效价,得出结论。
基因表达载体的构建主要包括: 1 病毒载体构建,2 转染;3 目的蛋白初步检测;4 抗生素筛选;5 目的蛋白再次检测;6 单克隆细胞株稳定性检测。
第四步:将目标基因导入受体细胞,就相对简单一点了,只要严格按照操作程序 进行,即可产生比较理想的结果。
在学校分子实验室逗留了一整天,参与了多个实验,傍晚,罗帆以办事为由,告 别了白映雪,在返回王府饭店的途中,罗帆给范西龙拨去电话,招呼他来王府饭店一
起吃晚饭。
现在,范西龙正在仁和医科大学读硕士研究生,颇为用功,此时,老范还在阶梯 151
· 此情可待 ·
教室里,如同老僧打坐般,像模像样地读书,接到罗帆的电话,老范一阵惊喜,立即 放下手中的书本,心急火燎地赶往王府饭店,两个人在约定好的王府饭店二楼西餐厅 里碰了面。
一见面,老范就张开
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